NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在水稻中應(yīng)用
水稻是我國(guó)重要的糧食作物之一。受限于人口壓力,可耕種面積減少以及自然災(zāi)害等壓力,培育高產(chǎn)抗病蟲(chóng)害的水稻品種是提高水稻產(chǎn)量的重要環(huán)節(jié)。隨著基因編輯技術(shù)的快速發(fā)展,分子生物學(xué)技術(shù)滲透到農(nóng)業(yè)育種的方方面面。所以轉(zhuǎn)基因指標(biāo)的檢測(cè),分子標(biāo)記育種等手段都需要進(jìn)行基因組DNA檢測(cè)。但是面對(duì)大量待篩選樣本,例如葉片、種子等,就目前實(shí)驗(yàn)室提取基因組DNA的技術(shù)手段,效率太低。無(wú)論是使用CTAB法還是硅膠柱提取法,整個(gè)提取純化過(guò)程費(fèi)時(shí)費(fèi)力。從而大大降低了實(shí)驗(yàn)室研究人員的積極性。
從經(jīng)濟(jì)角度考慮,目前應(yīng)用于水稻中提取基因組DNA的方法主要為CTAB法。該方法局限性很大,例如取材量大、步驟多、提取時(shí)間長(zhǎng)、使用不容易購(gòu)買(mǎi)的有毒有害試劑,且無(wú)法高通量操作。隨著田間出樣量逐年增加,該方法已經(jīng)不能滿足實(shí)驗(yàn)室需求,我司開(kāi)發(fā)的NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒可以解決以上痛點(diǎn)問(wèn)題。
—對(duì)樣本量要求低、微量(1-4mm葉片)
—操作簡(jiǎn)單快速(5分鐘釋放基因組DNA)
—室溫處理
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用蛋白酶
—不使用有毒有害有機(jī)試劑
操作流程
案例A 不同生長(zhǎng)時(shí)間采集水稻葉片擴(kuò)增2個(gè)基因
1、幼苗期 2、插秧期 3、分蘗期 4、拔節(jié)期
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-GR01)處理幼苗期、插秧期、分蘗期、拔節(jié)期葉片,2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長(zhǎng)度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例B 水稻不同大小葉片擴(kuò)增2個(gè)基因
幼苗期葉片長(zhǎng)度1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
成熟期葉片直徑1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-GR01)處理幼苗期和成熟期葉片,2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長(zhǎng)度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例C 水稻不同部位樣品擴(kuò)增2個(gè)基因
1、葉片 2、莖 3、根 4、花蕊 5、種子
使用NuSmart®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒(貨號(hào)Nu-GR01)處理根、莖、葉、花蕊、種子,2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長(zhǎng)度基因,分別為482bp(基因1)和134bp(基因2)。
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